Le Facteur VIII est une glycoprotéine synthétisée principalement par le foie. Il circule dans le plasma sous forme lié au VWF qui le protège d'une dégradation protéolytique rapide.
Il est activé par le FXa ou la thrombine en FVIIIa qui va se complexer avec le FIXa en présence de phospholipides pour activer le FX en FXa.
Un patient déficient en FVIII est atteint d'hémophilie A.
- Linéarité : 0 - 2 UI/mL ( 0-200%)
- Limite de détection 0,003 UI/mL (0,3%) FVIII
- Excellente discrimination de l'activité du FVIII
- Aucun plasma déficient en FVIII n’est utilisé
- Réactif en accord avec la pharmacopée européenne pour le dosage de FVIII
- Très stable sur automate
En présence de Ca2+ et de phospholipides, le FX est activé en FXa par le FIXa. Cette réaction est fortement stimulée par le FVIII après activation en FVIIIa par la thrombine.
En utilisant des concentrations optimales de Ca2+, de phospholipides et d'un excès de FIXa, de FX et de thrombine, le taux d'activation du FX est directement lié à la quantité de FVIII dans l'échantillon.
Le FXa hydrolyse le substrat chromogène, libérant ainsi le groupe chromophore pNA. L'intensité de la couleur est proportionnelle à l'activité FVIII dans l'échantillon.
- 2 flacons de réactif 1 (lyophilisat de FX bovin, et d'un inhibiteur de la polymérisation de la fibrine)
- 2 flacons de réactif 2 (FIXa et IIa humains lyophilisé, du chlorure de calcium et des phospholipides)
- 1 flacon de substrat chromogène du FXa (6 mL)
- 1 flacon de tampon de dilution Tris-BSA (20 mL)