Facteur Xa bovin- site actif bloqué (EGRck)

• < 1 % activité FXa - Site actif bloqué
• PM (g/mol) : 45 300
• Coefficient d'extinction : 12,4
• Activité déterminée par des tests de coagulation et chromogéniques
• Structure : 2 sous-unité PM : 16 200 et 28 800 Da, domaine Gla en N-terminal et 2 domaines EGF.

Le EGRck (ou Glu-Gly-Arg chloromethyl ketone) est un inhibiteur irréversible de protéases à sérine, conçu pour cibler les enzymes qui reconnaissent la séquence d'acides aminés Glu-Gly-Arg.

• Nom complet : Glutamyl-Glycyl-Arginyl chloromethyl ketone
• Abréviation : EGRck
• Type de molécule : Peptide chlorométhylcétone
• stabiliser des préparations protéiques en empêchant leur dégradation enzymatique.

Plus précisément :

• Nom complet : Glutamyl-Glycyl-Arginyl chloromethyl ketone
• Abréviation : EGRck
• Type de molécule : Peptide chlorométhylcétone

Comment agit-il ?

Le groupe chloromethyl ketone (CMK) est très réactif. Il forme une liaison covalente avec le résidu d'histidine situé dans le site actif des protéases à sérine, ce qui :

• inactive l'enzyme de manière irréversible ;
• empêche définitivement son activité catalytique.

Quelles enzymes inhibe-t-il ?

L'EGRck est principalement utilisé pour inhiber des protéases à sérine ayant une spécificité pour les résidus basiques, par exemple :

• Facteur VIIa (dans certaines conditions expérimentales),
• Facteur IXa,
• Facteur Xa,
• d'autres enzymes de type trypsine selon leur spécificité de reconnaissance.

Utilisation en recherche :

L'EGRck est employé pour :

• inhiber sélectivement certaines protéases dans des extraits biologiques ;
• étudier les mécanismes de la coagulation ;
• identifier les protéases impliquées dans une voie biologique donnée ;
• stabiliser des préparations protéiques en empêchant leur dégradation enzymatique

La très grande partie des enzymes est pure (sans additif) : pureté > 95 % SDS-PAGE.
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Une enzyme est une protéine catalysant une réaction biochimique. Elle convertit un substrat en un produit. Chaque enzyme possède une structure adaptée à sa fonction et son activité est dépendante d'une température et d'un pH optimum.
Le Facteur X (FX) est une glycoprotéine synthétisée par le foie, dépendante de la vitamine K. Le FX intervient dans la voie commune de la coagulation. Il est activé en FXa par le complexe FT-FVIIa ou par le complexe FVIIIa-FIXa en présence de phospholipides.
Le FXa est neutralisé par le TFPI et par l'antithrombine.

EGRck : Glu-Gly-Arg chloromethyl ketone. PM : 466 g/mol