DOSAGE POUR ESPÈCE HUMAINE

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4-E-0041HUM

Human abnormal prothrombin, APT ELISA Kit

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4-E-0050HUM

Human activated coagulation factor XII, FXIIa ELISA Kit

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4-E-0052HUM

Human activated protein C resistance, APCR ELISA Kit

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4-E-0053HUM

Human activated protein C, APC ELISA Kit

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4-E-0130HUM

Human annexin V, ANX-V ELISA Kit

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4-E-0131HUM

Human annexin-V ELISA Kit

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4-E-0144HUM

Human anti-cardiolipin antibody IgA, ACA-IgA ELISA Kit

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4-E-0145HUM

Human anti-cardiolipin antibody IgG, ACA-IgG ELISA Kit

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4-E-0146HUM

Human anti-cardiolipin antibody IgM, ACA-IgM ELISA Kit

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4-E-0182HUM

Human anti-glucoprotein 210, GP210 ELISA Kit

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4-E-0183HUM

Human anti-glycoprotein antibody, GP ELISA Kit

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4-E-0234HUM

Human anti-phosphatidyl serine antibody, APSA ELISA Kit

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4-E-0235HUM

Human anti-phospholipid antibody, Apl/APA ELISA Kit

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4-E-0263HUM

Human anti-thrombin III, AT-III ELISA Kit

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4-E-0264HUM

Human anti-thrombin receptor, ATR ELISA Kit

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4-E-0273HUM

Human anti-trypsin, AT ELISA Kit

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4-E-0469HUM

Human coagulation factor II, FII ELISA Kit

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4-E-0470HUM

Human coagulation tissular factor TF ELISA Kit

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4-E-0471HUM

Human coagulation factor VII, FVII ELISA Kit

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4-E-0472HUM

Human coagulation factor VIII related antigen, FVIII-Ag ELISA Kit

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4-E-0473HUM

Human coagulation factor IX, FIX ELISA Kit

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4-E-0474HUM

Human coagulation factor X, FX ELISA Kit

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4-E-0475HUM

Human coagulation factor XI, FXI ELISA Kit

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4-E-0476HUM

Human coagulation factor XII, FXII ELISA Kit

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4-E-0477HUM

Human coagulation factor XIII, FXIII ELISA kit

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4-E-0598HUM

Human D-Dimer, D2D ELISA Kit

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4-E-0610HUM

Human dermatan sulfate, DS ELISA Kit

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4-E-0614HUM

Human desmopressin/1-desamino-8-D-arginine vasopressin, dDAVP ELISA Kit

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4-E-0640HUM

Human elastase ELISA Kit

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4-E-0705HUM

Human fibrin ELISA Kit

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4-E-0706HUM

Human fibrinogen degradation product, FDP ELISA Kit

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4-E-0707HUM

Human fibrinogen like peptide 2, fgl2 ELISA Kit

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4-E-0708HUM

Human fibrinogen, Fbg ELISA Kit

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4-E-0709HUM

Human fibrinopeptide A, FPA ELISA Kit

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4-E-0710HUM

Human fibrinopeptide B, FPB ELISA Kit

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4-E-0713HUM

Human fibronectin, FN ELISA Kit

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4-E-0714HUM

Human fibronectin, FN ELISA Kit

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4-E-0715HUM

Human fibronectin, FN ELISA Kit

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4-E-0847HUM

Human heparan sulfate, HS ELISA Kit

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4-E-0848HUM

Human heparanase, HPA ELISA kit

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4-E-0849HUM

Human heparin associated antibody, HIT ELISA Kit

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4-E-0851HUM

Human heparin sulphate protoglycans, HSPG ELISA Kit

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4-E-0852HUM

Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor, HB-EGF ELISA Kit

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4-E-0882HUM

Human hirudin, HRD ELISA Kit

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4-E-1023HUM

Human kallikrein 1, KLK 1 ELISA Kit

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4-E-1024HUM

human kallikrein 10, hk10 ELISA kit

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4-E-1025HUM

Human kallikrein 10, KLK 10 ELISA Kit

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4-E-1026HUM

Human kallikrein 11, KLK 11 ELISA Kit

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4-E-1027HUM

Human kallikrein 6, KLK 6 ELISA Kit

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4-E-1096HUM

Human low molecular weight heparin, LMWH ELISA Kit

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4-E-1101HUM

Human L-selectin ELISA kit

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4-E-1307HUM

Human osteocalcin/bone gla protein, OT/BGP ELISA kit

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4-E-1308HUM

Human osteocalcin/bone gla protein, OT/BGP ELISA kit

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4-E-1311HUM

Human osteonectin, ON ELISA Kit

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4-E-1312HUM

Human osteopontin, OPN ELISA Kit

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4-E-1313HUM

Human osteopontin, OPN ELISA Kit

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4-E-1314HUM

Human osteoprotegerin, OPG ELISA KIT

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4-E-1401HUM

Human plasma anticoagulant protein C, PC ELISA Kit

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4-E-1402HUM

Human plasma anticoagulant protein S, PS ELISA Kit

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4-E-1403HUM

Human plasma fibronectin, pFN ELISA kit

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4-E-1404HUM

Human plasmin/fibrinolysin, PL/Fbn ELISA Kit

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4-E-1405HUM

Human plasmin-antiplasmin complex, PAP ELISA Kit

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4-E-1406HUM

Human plasminogen activator inhibitor 1, PAI-1 Elisa Kit

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4-E-1407HUM

Human plasminogen activator inhibitor 1, PAI-1 ELISA Kit

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4-E-1408HUM

Human plasminogen activator inhibitor, PAI ELISA Kit

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4-E-1409HUM

Human plasminogen activator, PLGA ELISA Kit

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4-E-1410HUM

Human plasminogen, Plg ELISA kit

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4-E-1411HUM

Human plasminogen, Plg ELISA Kit

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4-E-1412HUM

Human platelet activating factor, PAF ELISA Kit

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4-E-1413HUM

Human platelet antibodies IgG/M/A, PA-IgG/M/A ELISA Kit

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4-E-1414HUM

Human platelet associated antibody, PA-IgM ELISA Kit

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4-E-1415HUM

Human platelet basic protein, PBP ELISA Kit

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4-E-1416HUM

Human platelet factor 3, PF3 ELISA Kit

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4-E-1417HUM

Human platelet factor 4, PF-4 ELISA Kit

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4-E-1418HUM

Human platelet membrane glycoprotein IIbIIIa, GP‑IibIIIa ELISA Kit

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4-E-1419HUM

Human platelet membrane glycoprotein IV, GP-IV ELISA Kit

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4-E-1420HUM

Human platelet-associated complement 3, PAC3 ELISA Kit

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4-E-1421HUM

Human platelet-associated immunoglobulins, PAIg ELISA Kit

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4-E-1422HUM

Human platelet-derived growth factor AB, PDGF-AB ELISA kit

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4-E-1423HUM

Human platelet-derived growth factor receptor α, PDGFR-α ELISA kit

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4-E-1424HUM

Human platelet-derived growth factor soluble receptor α, PDGFsR-α ELISA kit

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4-E-1425HUM

Human platelet-derived growth factor, PDGF ELISA Kit

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4-E-1426HUM

Human platelet-derived growth factor-BB, PDGF-BB ELISA Kit

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4-E-1427HUM

Human platelet-derived growth factor-BB, PDGF-BB ELISA kit

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4-E-1471HUM

Human protein C ELISA Kit

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4-E-1472HUM

Human protein C, PC ELISA kit

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4-E-1473HUM

Human protein carbonyl, PC ELISA Kit

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4-E-1482HUM

Human protein S ELISA Kit

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4-E-1486HUM

Human protein Z ELISA Kit

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4-E-1493HUM

Human prothrombin fragment 1+2, F1+2 ELISA kit

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4-E-1494HUM

Human prothrombin, PT ELISA Kit

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4-E-1618HUM

Human soluble P-selectin, sP-selectin ELISA Kit

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4-E-1681HUM

Human thrombin, TM ELISA Kit

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4-E-1682HUM

Human thrombin-antithrombin complex, TAT ELISA Kit

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4-E-1683HUM

Human thrombin-thrombomodulin compound, T-TM ELISA Kit

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4-E-1684HUM

Human thrombomodulin, TM ELISA Kit

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4-E-1685HUM

Human thrombomodulin, TM ELISA Kit

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4-E-1686HUM

Human thrombopoietin, TPO ELISA kit

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4-E-1687HUM

Human thrombospondin 1, TSP-1 ELISA Kit

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4-E-1688HUM

Human thromboxane A2, TX-A2 ELISA Kit

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4-E-1689HUM

Human thromboxane B2, TX-B2 ELISA Kit

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4-E-1690HUM

Human thrombus precursor protein, TpP ELISA Kit

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4-E-1708HUM

Human tissue factor pathway inhibitor, TFPI ELISA Kit

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4-E-1709HUM

Human tissue factor, TF ELISA Kit

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4-E-1717HUM

Human tissue-type plasminogen actilyse, t-PA ELISA Kit

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4-E-1718HUM

Human tissue-type plasminogen activator, t-PA ELISA kit

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4-E-1728HUM

Human protein S total, TPS ELISA Kit

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4-E-1797HUM

Human urokinase, UK ELISA Kit

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4-E-1798HUM

Human urokinase-type plasminogen activator receptor, PLAUR/uPAR ELISA kit

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4-E-1799HUM

Human urokinase-type plasminogen activator, uPA/PLAU ELISA Kit

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4-E-1800HUM

Human urokinase-type plasminogen activator, uPA/PLAU ELISA Kit

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4-E-1839HUM

Human von Willebrand Factor, vWF ELISA kit

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4-E-1840HUM

Human von Willebrand Factor, vWF ELISA Kit

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4-E-1847HUM

Human α1-antitrypsin, α1-AT ELISA Kit

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4-E-1848HUM

Human α1-microglobulin, α1-MG ELISA Kit

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4-E-1849HUM

Human α1β glycoprotein, α1β-GP ELISA Kit

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4-E-1850HUM

Human α2 macroglobulin, α2 MG ELISA Kit

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4-E-1851HUM

Human α2-antiplasmin, α2-AP ELISA Kit

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4-E-1852HUM

Human α2-plasmin inhibitor, α2-PI ELISA Kit

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4-E-1874HUM

Human β2-glycoprotein 1 antibody IgA, β2-GP1 Ab IgA ELISA Kit

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4-E-1875HUM

Human β2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M, β2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit

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4-E-1876HUM

Human β2-glycoprotein 1 antibody IgG, β2-GP1 Ab IgG ELISA Kit

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4-E-1877HUM

Human β2-glycoprotein 1 antibody IgM, β2-GP1 Ab IgM ELISA Kit

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4-E-1886HUM

Human β-thromboglobulin, β-TG ELISA Kit

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4-E-2014HUM

Human antitrypsin (AT)ELISA Kit

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Description


Les recommandations ci-dessous donnent des directives générales pour la mise au point d’une méthode ELISA mais ne se veulent pas absolues. L’optimisation des conditions de dosage reste sous la responsabilité des chercheurs.
Tampons de base :
  • Tampon TBS : 8,76 gr de NaCl + 2,42 gr de Tris base dans 900 mL d’eau déminéralisée. Ajuster le pH à 7,4 avec du HCl 6N puis ajuster le volume à 1 litre avec de l’eau déminéralisée.

  • Tampon pour le coating : 1,7 gr de Na₂CO₃ (carbonate de sodium 50 mM, pH 9,6) + 2,86 grammes de NaHCO₃ dans 900 mL d’eau déminéralisée. Ajuster le pH à 9,6 puis ajuster le volume final à 1 litre avec de l’eau déminéralisée.

  • Tampon de fixation : TBS contenant 2,0 % (p / v) de BSA.

  • Tampon de lavage : TBS contenant 0,05 % (v / v) de Tween 20.

  • Tampon de réaction : TBS contenant 0,02 % (p / v) de BSA et 0,05 % (v / v) de Tween 20.

Microplaque pour le coating : Sélectionnez des plaques qui ont été certifiées pour les applications ELISA. Diluer la protéine qui sera immobilisée au fond des puits (généralement un anticorps, cependant, certains dosages peuvent nécessiter que l’antigène soit immobilisé sur la plaque) à la concentration désirée dans le Tampon pour le coating. Pour les anticorps monoclonaux et pour les anticorps polyclonaux purifiés par affinité, nous recommandons une concentration du tampon de coating de 10 microgrammes par mL. Pour les anticorps polyclonaux non purifiés par affinité, nous recommandons une concentration du tampon de coating de 25 microgrammes par mL.
Ajouter la solution de coating sur la plaque d’essai (0,1 mL par puits est la pratique courante), couvrir la plaque et la laisser incuber pendant 2 heures à température ambiante, ou pendant la nuit (environ 16 heures) à 4° C.
Fixation : Retirer la solution de coating de la plaque et remplir les puits à 90 % de leur capacité (environ 400 microlitres pour une plaque standard de 96 puits) avec le tampon de fixation. Incuber la plaque pendant 2 heures à température ambiante, ou pendant une nuit (environ 16 heures) à 4° C.
Étalonnage : Les courbes d’étalonnage sont généralement générées par dilution de l’étalon titré à 100 ng par mL dans le Tampon de réaction avec des dilutions en série pour faire huit concentrations de l’étalon dans la gamme de 100 à 0,78 ng par mL. Ajouter 0,1 mL de chaque dilution dans les puits appropriés de la plaque. Les dosages des étalons sont généralement effectués en double.
Échantillons : Les échantillons sont dilués dans le Tampon de réaction de sorte qu’ils se trouvent dans la plage de travail de la courbe d’étalonnage (0,78 à 100 ng par mL). Ajouter 0,1 mL de chaque échantillon dans les puits appropriés de la plaque. Les échantillons sont généralement mesurés en double exemplaire à deux ou plusieurs dilutions.
Durées d’incubation : L’incubation primaire (celle impliquant les étalons ou les échantillons sur la plaque) est généralement réalisée en 2 heures à température ambiante ou pendant une nuit (16 heures) à 4° C.
L’incubation secondaire celles impliquant l’ajout des d’anticorps secondaires ou des conjugués d’anticorps est généralement effectuée pendant 1 heure à température ambiante.
Les temps d’incubation peuvent être raccourcis en effectuant les étapes à 37° C.
Une dilution de 5 microgrammes par mL pour les anticorps monoclonaux et 10 microgrammes par mL pour les anticorps polyclonaux est recommandée comme point de départ. D’autres phases d’optimisation peuvent être nécessaires en fonction de votre test.
Développement : Les deux enzymes les plus communes utilisées pour la détection sont la peroxydase de raifort et la phosphatase alcaline. Pour la peroxydase de raifort, les substrats les plus courants sont le tétraméthylbenzidine (TMB) et le o-phénylènediamine (OPD). Le substrat commun pour la phosphatase alcaline est le phosphate de p-nitrophényle (PNPP). Nous vous recommandons de suivre les instructions du fabricant pour l’utilisation de ces substrats.
Optimisation : Développer une méthode ELISA sensible et reproductible nécessite l’optimisation de nombreuses conditions, y compris le choix des anticorps, des concentrations d’anticorps, des temps d’incubation, des températures d’incubation, des conditions de lavage, etc. Le choix des anticorps et la concentration d’anticorps utilisés peut influer sur la sensibilité et le bruit de fond. Enfin, des ajustements de tampons peuvent être nécessaires pour obtenir des résultats optimaux.

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